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現(xiàn)代生物醫(yī)學進展
題名:釀酒酵母遺傳缺陷型菌株化學轉化方法研究
作者:崔鐵忠; 盧康榮; 李
出版年:2016
卷期:08
頁碼:
分類:總論
內(nèi)容摘要:目的:通過改善轉化條件提高缺陷型釀酒酵母DNA轉化效率。方法:以醋酸鋰化學轉化法為基礎以釀酒酵母菌株fab1::KAN作為遺傳轉化受體以敲除MZM1基因為轉化目的對影響遺傳缺陷型菌株轉化效率的參數(shù)(醋酸鋰前處理、熱激時間及轉化后復蘇時間)進行優(yōu)化確定適合缺陷型酵母DNA轉化的最佳方法。結果:不同時間(30 min60 min和120 min)醋酸鋰的前處理均可以提高其轉化效率熱激前使用醋酸鋰處理酵母30 min轉化效率最高;熱激10 min是轉化效率由高到低的轉折點30 min熱激明顯降低了轉化效率;YPD培養(yǎng)基用于轉化后酵母的復蘇隨培養(yǎng)時間(30 min60 min和120 min)的延長酵母轉化效率逐步增加120 min作為熱敏性菌株轉化后的復蘇時間較佳。結論:與野生型菌株類似通過轉化條件的優(yōu)化遺傳缺陷型菌株的轉化效率也可以滿足大多數(shù)試驗要求。 更多還原