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人胰島素樣生長(zhǎng)因子Ⅱ在甲醇營(yíng)養(yǎng)型酵母P.pastoris中的表達(dá)、分泌和性質(zhì)研究
題名：中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào)
作者：李旌軍黃秉仁
出版年：1999
卷期:06
頁(yè)碼:
分類:總論
內(nèi)容摘要: 為獲得IGF－Ⅱ的高效表達(dá)，構(gòu)建了其多拷貝、分泌型表達(dá)載體：含有5個(gè)串聯(lián)的IGF－Ⅱ表達(dá)單元；由受甲醇誘導(dǎo)的醇氧化酶啟動(dòng)子控制表達(dá)；利用啤酒酵母α因子的前導(dǎo)肽引導(dǎo)分泌．線形化表達(dá)載體轉(zhuǎn)化P．pastoris蛋白酶缺陷型菌株后，篩選到有IGF－Ⅱ表達(dá)和分泌的陽(yáng)性轉(zhuǎn)化子；進(jìn)一步優(yōu)化表達(dá)、培養(yǎng)條件后，IGF－Ⅱ在高密度發(fā)酵上清中的產(chǎn)量可達(dá)60mg／L．對(duì)P．pastoris產(chǎn)生的rhIGF－Ⅱ的性質(zhì)分析表明，其具有正確的分子量，N端和較好的生物活性．